全面質量管理(Total quality management,TQM)屬于質量管理的里程碑。全面指的是對藥品研發全工程的管理。全面質量管理的重點是設計為主,持續改進,同時以客戶為中心,全面提高水平。在藥品研發過程中,質量管理涉及的內容非常多。本文以索利那新原料藥為例,采用液相和氣相兩種方式,分析藥物質量控制要點。
1 關于索利那新的質量控制
索利那新是一種用于膀胱過度活動癥患者,伴有的尿失禁和/或尿頻、尿急癥狀的治療的藥物,在醫療市場獲準治療范圍較廣。對索利那新原料藥的質量進行研究,可優化質量,保證產品的穩定。在原料藥質量控制過程中,比較復雜的就是雜質的研究與控制。
1.1 索利那新原料藥的雜質以及主要反應步驟
通常雜質引入的途徑有以下幾種途徑:在生產工藝中引入(存在原因:原料不純、原料反應不完全、副反應產生雜質);在貯存過程中引入(貯存過程中受到溫度、濕度、光照、氧化等外因的干擾產生雜質)。在生產工藝中引入雜質需要從源頭進行控制,按照合成線路的各個步驟使用的原料進行逐個分析。
關于索利那新原料藥,反應步驟如下:
反應步驟:從1,2,3,4-四氫異喹啉合成得到中間體1,中間體1與R-奎寧醇合成得到中間體2,中間體2與結合生成成品索利那新。
主要原料:1,2,3,4-四氫異喹啉、R-3-奎寧醇,分別從性狀、紅外及液相保留時間鑒別、卡爾費休水分分析,及液相、氣相及滴定法對含量、雜質、異構體、熾灼殘渣分析等方面進行質量檢測。四氫異喹啉要求總雜質不大于1.0%,其他單個最大雜質不大于0.3%,含量98.0%～102.0%,異構體雜質不大于0.5%。R-3-奎寧醇要求氣相總雜質不大于1.0%,其他單個最大雜質不大于0.2%,通過滴定法進行含量控制,要求其含量不低于85%,異構體雜質不大于0.2%。
在合成過程中,通過高效液相色譜監測反應轉化程度,控制反應液中原料1,2,3,4-四氫異喹啉的殘留量不大于0.3%;工藝操作中設計了精制工序,以進一步去除雜質。
1.2 索利那新原料藥質量控制體系以及標準的建立
結合工藝流程、藥典以及國際法的要求,對于索利那新建立合理的質量控制體系,關于質量控制體系的建立標準,氣、液相相關內容如表1。
表1 相關標準 導出到EXCEL
| 項目名稱 | 標準 |
| 鑒別 | (1)IR |
| (2)HPLC | |
| 水分 | ≤0.5% |
| 有關物質 | HS026101≤0.15% |
| HS026302≤0.15% | |
| 其它單個雜質≤0.10% | |
| 總雜質(除異構體、HS026201外)≤0.30% | |
| HS026201* | ≤0.015% |
| 異構體 | HS026305≤0.15% |
| HS026303≤0.15% | |
| HS026304≤0.15% | |
| 含量(無水無殘溶計) | 含C27H32N2O6應為98.0～102.0% |
| (無水無殘溶計) | 23.0～26.0% |
| 殘留溶劑/ ppm | 異丙醇≤5000 |
| 叔丁醇≤5000 | |
| 甲苯≤890 |
2 相關雜質檢驗分析
2.1 高效液相色譜法檢驗測試索利那新的雜質
高效液相色譜法的開發結合藥典通則、生產工藝、藥物特性(如HS026201為潛在基因毒性雜質,定為不大于0.015%的限度較低)等多種因素綜合研究,通過帶有紫外檢測器的反相高效液相色譜檢測索利那新的雜質。
試劑:乙腈、水、磷酸氫二鉀、磷酸。
儀器:液相色譜儀;流動相過濾器;A級玻璃儀器,色譜柱:Waters RP18峰鑒別溶液:取HS026101、HS026302和索利那新各對照品適量,配制成各濃度約為0.5µg/mL、0.5µg/mL、0.5mg/mL的溶液。
對照溶液:取索利那新對照品適量,配制成濃度約2.5µg/ml的溶液。
樣品溶液:取索利那新樣品適量,配成濃度約0.5mg/mL的溶液,平行配制2份。
色譜條件:檢測波長:210nm;流速:1.0mL/min;柱溫:30℃;進樣量:10µL。
采集時間:約2.5倍主峰保留時間。
完成上述操作后,制備緩沖液,運行序列。系統適用性滿足要求后,如圖1,進樣品溶液,按公式計算單個雜質、總雜質含量。
圖1 峰鑒別溶液
每一個參數和標準都要進行驗證。
采用信噪比的方法來計算理論定量限和檢測限,確定方法的檢測靈敏度。
配制0.015%樣品濃度索利那新溶液、0.004%樣品濃度的HS026101、0.010%樣品濃度的HS026302,連續進樣6次,信噪比在10～15之間,為定量限。將定量限溶液稀釋約3倍,信噪比在2～5之間,為檢測限。專屬性方面,在沒有其他峰干擾的情況下,通過分離度來評估其專屬性,要求使HS026302與索利那新之間分離度≥3.0,則認為專屬性符合要求。為了在精密度方面有很大的提升,需要配置6份相同的索利那新樣品溶液(溶液A1、A2、A3、A4、A5和A6),并且進樣;另一方面,配制6份加入已知雜質限度濃度的同一批索利那新樣品溶液(溶液AC1、AC2、AC3、AC4、ACS和AC6),并且進樣。
定量精密度:接受標準為各系列的6針進樣結果的RSD不大于5%。加入已知雜質限度濃度精密度:溶液AC1、AC2、AC3、AC4、ACS和AC6中每個雜質的回收率:80%～120%,RSD不大于25%。
在線性關系方面,配制5份不同濃度水平的標準溶液,來評價方法的線性。雜質分別為限度濃度的400%、200%、100%、50%和25%。一方面,配制上述5個濃度水平的標準溶液(溶液B1、C1、D1、E1和F1)。另一方面,同樣配制相同的份索利那新溶液,加入相應量的對照品(溶液BC1、CC1、DC1、EC1和FC1)。每個樣品進一次。采用最小二乘法來計算包括對照液和加入標準的對照液系列的回歸曲線來評價各溶劑量和峰面積的線性關系。線性的接受標準為:相關系數不小于0.99,截距百分比≤15.0%。
準確度驗證方法:使用溶液AC1、AC2、AC3、CC1和DC1。計算實驗濃度(通過代入相應回歸曲線)和實際濃度的比值來計算溶液回收率。計算所有回收率的RSD。通過Student檢驗法來對準確度進行評價,以判斷回收率是否接近100%,未接標準為:定量限RSD≤50%,回收率:50%～150%,其它點RSD≤25%,回收率:80%～120%。經過反復的計算,就可以得到相關的濃度范圍,也能夠確定好質量。
2.2 氣相檢測方式
所需要的儀器:氣相色譜儀,FID檢測器,頂空進樣器。
使用的色譜柱為:DB-624毛細管色譜柱(30m×0.53mm×3µm)。
氣相色譜法檢測索利那新中的殘留溶劑。檢測靈敏度、線性、回收率、范圍等參數也要進行驗證。
3 結語
通過對索利那新氣相以及液相的相關研究,發現在保證藥品生產質量中需要制定合理的指標標準,同時制定出合理的檢驗方式。通過檢驗分析,檢驗的合理性、穩定性、耐用性是檢驗方法的重點。氣相、液相兩種方式都是索利那新原料質量標準和檢測不可或缺的,可以適應并穩定的用于該種原料藥的檢驗,從而保證原料藥的改善,確保最終可以達到要求,對患者的健康用藥有一定的保證。另外,需要重點說明一個問題,檢測分析方法長期使用穩定性,也是重點關注的問題,需要我們長期的跟蹤與研究。
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